На самом деле, чтобы точно ответить на ваш вопрос необходимо знать, что у вас за звуковая карта, через какой драйвер работает и на чем вы слушаете, имеется ввиду колонки, наушники, какая коммутация. Хотя впринципе и самая дешевая карта способна дать разницу между FLAC и mp3, однако бывают ньюансы...
Далее, не редкими бывают случаи так называемого апконверта. Это когда мп3 128kbps конвертируется в 320 kbps (поясняю термин). Понятно что качество останется на уровне 128, хотя в свойствах будет 320. То же самое и с FLAC, встречаются в сети файлы сделанные из того же мп3. Понятно что в таком случае отличий вы не найдете как ни старайся. Простейшим способом проверить - будет сделать спектральный анализ файла и посмотреть по высоким частотым (в мп3 есть фсегда срезы) не является ли это конфертированным файлом, а не копией оригинала.
Ниже привел скриншоты спектрограмм файла mp3 160kbps и FLAC. Смотрим верхнюю часть спектра.